分枝桿菌是包括結(jié)核分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌在內(nèi)的一類特殊病原體，結(jié)核病主要是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium Tuberculosis，MTB）感染后出現(xiàn)的一種慢性感染性疾病，往往會(huì)對(duì)患者全身多個(gè)器官、系統(tǒng)造成危害。有數(shù)據(jù)報(bào)道顯示，我國(guó)非結(jié)核分枝桿菌（NTM）感染的發(fā)病率已經(jīng)逐漸超過(guò)結(jié)核病。亞洲人群NTM發(fā)病率已經(jīng)增長(zhǎng)到約39.6例/10萬(wàn)人年，并且仍以每年增長(zhǎng)19例/10萬(wàn)人的速率快速攀升。NTM是除了結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌以外的所有分枝桿菌，種類繁多，現(xiàn)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的至少50多種，可廣泛感染人體肺部、皮膚、軟組織、淋巴結(jié)、血液等部位，臨床癥狀取決于感染部位，肺部感染癥狀與MTB類似，臨床診斷較困難；對(duì)大部分抗結(jié)核藥物天然耐藥。對(duì)于早期不能正確鑒別MTB或者NTM的患者抗結(jié)核療效往往較差，而且易導(dǎo)致耐藥菌的產(chǎn)生[1]。
“2035年終結(jié)結(jié)核病流行”，這是世界衛(wèi)生組織提出的目標(biāo)，意味著結(jié)核病發(fā)病率要降至10/10萬(wàn)以下。而最新數(shù)據(jù)顯示，全球結(jié)核病發(fā)病率在133/10萬(wàn)，我國(guó)發(fā)病率是52/10萬(wàn)，距離目標(biāo)均有差距。早期有效的診斷是確保治療效果以及改善預(yù)后的重要環(huán)節(jié)，其中顯微鏡檢查是臨床應(yīng)用較為廣泛的手段，但存在檢出率較低的不足。細(xì)菌培養(yǎng)是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的MTB診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但該診斷方式往往需要較長(zhǎng)時(shí)間，存在時(shí)效性欠佳的局限。盡管近年來(lái)相關(guān)免疫學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)獲得長(zhǎng)足發(fā)展，但仍存在檢驗(yàn)結(jié)果尚未規(guī)范或/和適用人群廣泛性較差等問(wèn)題。由此可見(jiàn)，尋找一種快速、準(zhǔn)確，且診斷效能較佳的檢測(cè)方法，對(duì)改善結(jié)核病診斷現(xiàn)狀具有極其重要的意義[2]。
核酸飛行時(shí)間質(zhì)譜（簡(jiǎn)稱“核酸質(zhì)譜”）能夠?qū)崿F(xiàn)樣品轉(zhuǎn)化為帶電離子并根據(jù)質(zhì)荷比實(shí)現(xiàn)高度精準(zhǔn)分離，最后生成質(zhì)譜圖，視覺(jué)直觀性強(qiáng)，具有PCR技術(shù)的高靈敏度、芯片技術(shù)的高通量、質(zhì)譜技術(shù)的高精準(zhǔn)度以及生物信息的智能分析，重復(fù)性高，能夠檢測(cè)病原體及其分子分型、藥物代謝基因突變、DNA甲基化分析以及腫瘤突變等顯著優(yōu)勢(shì)而逐漸在結(jié)核分枝桿菌的鑒定及耐藥檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用[3]。
結(jié)核分枝桿菌常用診斷方法的比較
華大吉比愛(ài)核酸質(zhì)譜結(jié)核檢測(cè)解決方案華大吉比愛(ài)GBIMToF-1000核酸質(zhì)譜技術(shù)以核酸作為結(jié)核分枝桿菌鑒定的生物標(biāo)志物,通過(guò)對(duì)多靶點(diǎn)基因片段進(jìn)行多重PCR特異性擴(kuò)增，去除脫氧核糖核苷酸后，進(jìn)行各個(gè)位點(diǎn)的單堿基延伸反應(yīng)，經(jīng)處理后的延伸反應(yīng)產(chǎn)物同質(zhì)譜所需基質(zhì)混合，放入飛行時(shí)間質(zhì)譜儀中運(yùn)行，每份樣本會(huì)得到獨(dú)特的質(zhì)譜圖，經(jīng)過(guò)判讀后獲得菌種及耐藥信息。
核酸質(zhì)譜GBIMToF-1000在結(jié)核分枝桿菌的鑒定及耐藥檢測(cè)流程示意圖
GBIMToF-1000核酸質(zhì)譜快速鑒定分枝桿菌菌種
GBIMToF-1000核酸質(zhì)譜鑒定分枝桿菌對(duì)常用藥物的耐藥性
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